Comparación del cultivo "in vitro" de Toxoplasma gondii cepa RH en las líneas celulares Hep-2 y Vero / Comparison of "in vitro" culture of Toxoplasma gondii RH strain in Hep-2 and Vero cell lines

Introducción: La toxoplasmosis es una zoonosis causada por Toxoplasma gondii, parásito intracelular obligado capaz de replicarse en todas las células nucleadas, permitiendo su aislamiento y mantenimiento en cultivo celular. Objetivo: Comparar el cultivo de Toxoplasma gondii (RH), en células Hep-2 y Vero empleadas para propagación parasitaria. Métodos: Se optimizaron las condiciones para cultivo de Toxoplasma gondii (RH), en células Vero y Hep-2; se sembraron 500.000 y 1.000.000cel./mm3 y se infectaron 1.000.000 y 2.000.000taq/mm3 respectivamente, se hizo seguimiento hasta las 120 horas para determinar invasión celular, porcentaje de rosetas, de viabilidad y rendimiento de taquizoitos. Resultados: A las 48 horas de incubación se evidenció el 90% de invasión parasitaria en las dos líneas celulares así como el mayor recuento de rosetas; a las 120 horas se obtuvieron los mayores recuentos de taquizoitos extracelulares y un mayor índice de rendimiento de 185,9 en las células Hep-2, en la concentración de 500.000cel./mm3 y 1.000.000taq/mm3. Se obtuvo una viabilidad parasitaria promedio superior al 80% para las dos líneas celulares. Conclusiones: Se obtuvo un mayor rendimiento parasitario viable en las células Hep-2 por lo que esta línea celular puede considerarse como el mejor modelo para la propagación y mantenimiento parasitario de T. gondii (RH).

Introduction: Toxoplasmosis is a zoonosis caused by Toxoplasma gondii, which is an obligate intracellular parasite capable of replicate itself in all nucleated cells, allowing their isolation and maintenance in cell culture. Objective: To compare cultivation Toxoplasma gondii (RH) in Hep-2 cells and Vero employed to spread parasitic. Methods: The conditions were optimized for cultivation of Toxoplasma gondii (RH) in Vero and Hep-2 cells lines, 500.000 and 1.000.000cel./mm³ were seeded and 1.000.000 and 2.000.000taq/mm³ were infected respectively, a track to determine cell invasion, percentage of rosettes and viability and efficiency of tachyzoites was made until the 120 hours. Results: After 48 hours of incubation, 90% of parasite invasion was evident in both cell lines as well as the largest count rosettes. At 120 hours higher counts of extracellular tachyzoites and a higher rate of performance of 185.9 in Hep-2 cells at concentration of 1.000.000taq/mm³ and 500.000cel./mm³ were obtained. Average parasite viability over 80 % was obtained for both cell lines. Conclusions: Higher parasitic performance was obtained viable in Hep-2 cells, so that this cell line can be considered as the preferred model for the propagation and maintenance of T. gondii (RH).

Efectos del tratamiento con péptidos similares a leptina sobre factores asociados con el control de grasa corporal en ratas Wistar alimentadas con dieta alta en grasa / Effects of treatment with leptin-like peptides on factors related to body fat control in Wistar rats fed a high-fat diet

Introduction: The results of administering recombinant leptin, as well as the 116-130 peptide of mouse leptin in ob/ob mice have shown the probability of discovering more efficient leptin-based therapeutic methods to treat obesity.Objective: To demonstrate in Wistar rats fed with high-fat diet if the administration of synthetic peptides corresponding to the 116-130 peptide of mouse leptin (SR 116), its human homologue peptide (SH 95: sequence 95-109 from the 1AX8 protein) and five modified peptides (P80 to P84) similar to these two peptides, produces effects related to regulation of body fat.Materials and methods: Nine-week old Wistar rats were fed a high-fat diet for fifteen weeks. On the fifteenth week, and for five consecutive days, they were treated with the peptides to be evaluated. During the days of treatment, body weight and food intake were evaluated. After the last peptide administration, lipid profile, glycerol in the cellular medium, and DNA fragmentation in adipocytes were analyzed.Results: The results revealed that: the SR116 peptide affects the regulation of adiposity in rats fed a high-fat diet. The SH 95 is the human peptide with biological activity similar to SR 116 to lower weight, lessen food intake, and increase free glycerol in the cellular medium. The P80 and P81 peptides had a similar effect on SR 116 and SH 95 regarding body weight and food intake. The SR 116, SH 95 and three of the modified peptides (P80, P81, and P82) caused DNA fragmentation.Conclusion: The results suggest that peptides analogous to leptin are potentially viable to achieve effects of adiposity reduction in Wistar rats with obesity associated to high-fat diet; more research is rendered to explain the differences among peptides and the biological action mechanisms.

Introducción: Los resultados de administrar leptina recombinante así como del péptido 116-130 de leptina de ratón en ratones ob/ob han demostrado la probabilidad de descubrir métodos terapéuticos más eficientes basados en leptina para tratar la obesidad.Objetivo: Comprobar, en ratas Wistar alimentadas con dieta alta en grasa, si la administración de los péptidos sintéticos correspondientes al péptido 116-130 de leptina de ratón (SR 116), péptido humano similar al de ratón (SH 95), correspondiente a la secuencia 95-109 de la proteína 1AX8 y cinco péptidos modificados (P80 a P84), similares a estos dos péptidos produce efectos relacionados con la regulación de la grasa corporal.Materiales y métodos: Ratas de 9 semanas de edad recibieron, durante 15 semanas, una dieta alta en grasa. En la semana 15, por 5 días consecutivos, se trataron con los péptidos a evaluar. Durante los días de tratamiento se evaluó el peso corporal y el consumo de alimento. Después de la última administración de los péptidos se analizó perfil lipidio, glicerol en el medio celular y fragmentación del ADN en adipocitos.Resultados: Los resultados muestran que el péptido SR116 ejerce efectos sobre el control de la adiposidad en ratas alimentadas con dieta alta en grasa. El SH 95 es el péptido humano con actividad biológica similar al SR 116 para reducir peso, consumo de alimento y mayor liberación de glicerol en el medio celular. Los péptidos P80 y P81 produjeron un efecto similar al SR 116 y al SH 95 en cuanto a peso corporal y consumo de alimento. El SR 116, SH 95 y tres de los péptidos modificados (P80, P81 y P82) ocasionaron fragmentación del ADN.Conclusión: Los resultados indican que péptidos análogos a la leptina son potencialmente viables para lograr efectos de reducción de la adiposidad en ratas Wistar con obesidad asociada con dietas altas en grasa. Se requieren otras investigaciones para explicar las diferencias entre péptidos y los mecanismos de acción biológica.